一．實(shí)驗(yàn)簡介

物體認(rèn)知實(shí)驗(yàn)方法是 1988 年由 Ennaceur 提出，它是基于嚙齒類動物天生具有的新奇偏愛性，用于檢測動物的學(xué)習(xí)記憶能力，其與傳統(tǒng)的檢測方法相比，不需給予正向( 獎(jiǎng)賞) 或反向( 懲罰) 的刺激，也不需冗長的訓(xùn)練，動物分別根據(jù)“新舊物體”特征、位置、出現(xiàn)的順序和所處的背景對“新舊物體”進(jìn)行辨別，能夠檢測從簡單的物體識別記憶到復(fù)雜的空間、時(shí)序和情景記憶，對動物學(xué)習(xí)記憶行為實(shí)現(xiàn)精細(xì)化區(qū)分，實(shí)驗(yàn)簡單易操作。在學(xué)習(xí)記憶發(fā)生發(fā)展機(jī)制、認(rèn)知障礙防護(hù)藥物和保健品研發(fā)等方面具有重要應(yīng)用價(jià)值。

研究物體認(rèn)知實(shí)驗(yàn)方法有四種：新物體識別實(shí)驗(yàn)、物體位置識別實(shí)驗(yàn)、時(shí)序記憶實(shí)驗(yàn)和情景記憶實(shí)驗(yàn)。這四種實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)步驟和評價(jià)指標(biāo)為學(xué)習(xí)記憶研究提供一種基于動物自發(fā)行為，多模式、精細(xì)敏感的行為實(shí)驗(yàn)方法。

二．實(shí)驗(yàn)方法

1.新物體識別實(shí)驗(yàn)：

適應(yīng)期：實(shí)驗(yàn)中將動物放入沒有任何物體的實(shí)驗(yàn)箱中，每只每天 10 min，每天 1 次，連續(xù) 3 d。

熟悉期：第 4天進(jìn)行熟悉期實(shí)驗(yàn)，開始時(shí)箱中不放入任何物體，將動物放入再次適應(yīng) 2 min，動物取出后，放入兩個(gè)*相同的物體，分別記錄每只動物 5 min 內(nèi)對左側(cè)物體的探索時(shí)間( exploration time for left object，Tl) 和對右側(cè)物體的探索時(shí)間( exploration time for

right object，Tr) 。

測試期：熟悉期后將動物放回飼養(yǎng)籠中，10 min 后開始測試期實(shí)驗(yàn)。測試期時(shí)放入兩個(gè)不同的物體，其中一個(gè)物體與熟悉期的物體*相同，另外一個(gè)是新奇物體（與熟悉期物體匹配），動物放入后計(jì)時(shí) 5min，分別記錄動物在不同時(shí)間段對熟悉物體的探索時(shí)( exploration time for familiar object，Tf) 和對新奇物體的探索時(shí)間( exploration time for novel object，Tn)。探索活動定義為: 小鼠的鼻子近距離指向物體或者直接嗅、舔物體。當(dāng)其他部位接觸物體而鼻子沒有指向物體或站在物體上時(shí)非對物體的探索活動。

2.物體位置識別實(shí)驗(yàn)：

適應(yīng)期與熟悉期實(shí)驗(yàn)過程同新物體識別實(shí)驗(yàn)，而測試期與新物體識別實(shí)驗(yàn)不同，只是將熟悉期中兩個(gè)相同物體中的一個(gè)移到新的位置，動物放入后計(jì)時(shí) 5 min，分別記錄動物在不同時(shí)間段對兩不同物體的探索時(shí)間。

3.時(shí)序記憶實(shí)驗(yàn)：

時(shí)序記憶實(shí)驗(yàn)程序和上述兩種方法有所不同，實(shí)驗(yàn)流程見圖 1，包括 2 個(gè)熟悉期，即熟悉期1和熟悉期 2，其他過程基本相同。適應(yīng)期同新物體識別。 第 4 天進(jìn)行熟悉期實(shí)驗(yàn)，開始時(shí)箱中無任何物體，將動物放入再次適應(yīng) 2 min，動物取出后放入兩相同的物體，進(jìn)行熟悉期 1 實(shí)驗(yàn)，分別記錄 5 min 內(nèi)對兩個(gè)*相同物體的探索時(shí)間; 將動物取出后放

入飼養(yǎng)籠中，10 min 后進(jìn)行熟悉期 2 實(shí)驗(yàn)，在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)箱中放入另外兩個(gè)*相同的物體（與熟悉期1 中物體匹配），分別記錄 5 min 內(nèi)對兩個(gè)*相同物體的探索時(shí)間。熟悉期 2 后將動物放回飼養(yǎng)籠中，10 min 后開始測試期實(shí)驗(yàn)。測試期時(shí)放入兩個(gè)不同的物體，分別是熟悉期 1 和熟悉期 2 中各一個(gè)物體，動物放入后計(jì)時(shí) 5 min，分別記錄在不同時(shí)間段對兩不同物體的探索時(shí)間 

4.情景記憶實(shí)驗(yàn)：

情景記憶實(shí)驗(yàn)程序與時(shí)序記憶實(shí)驗(yàn)類似，也包括2 個(gè)熟悉期，但在不同背景的實(shí)驗(yàn)箱中進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)流程見圖 2。適應(yīng)期實(shí)驗(yàn)將動物放入具有種背景的實(shí)驗(yàn)箱中，適應(yīng)完成 10 min 后，再放入第二種背景的實(shí)驗(yàn)箱中，每種實(shí)驗(yàn)箱適應(yīng)過程與新物體識別中適應(yīng)期實(shí)驗(yàn)相同。第 4 天開始熟悉期實(shí)驗(yàn)，在具有種背景的實(shí)驗(yàn)箱中放入兩相同的物體，進(jìn)行熟悉期 1 實(shí)驗(yàn)，分別記錄 5 min 內(nèi)對兩個(gè)*相同物體的探索時(shí)間; 將動物放回飼養(yǎng)籠中，10 min 后進(jìn)行熟悉期 2 實(shí)驗(yàn)，在具有第二種背景的實(shí)驗(yàn)箱中放入另外兩個(gè)*相同的物體( 與熟悉期 1 中的物體匹配) ，分別記錄 5 min 內(nèi)對兩相同物體的探索時(shí)間。熟悉期 2 后將動物取出放入飼養(yǎng)籠中，10 min 后進(jìn)行測試期實(shí)驗(yàn)，計(jì)時(shí) 5 min，分別記錄在不同時(shí)間段

對兩不同物體的探索時(shí)間。

不同時(shí)間間隔時(shí)的物體辨別記憶能力考察將動物隨機(jī)分為 5 組，熟悉期與測試期間隔分別設(shè)置為 10 min，30 min，60 min，90 min，120 min。

實(shí)驗(yàn)步驟與新物體識別實(shí)驗(yàn)相同，僅每組動物檢測時(shí)熟悉期與測試期間隔不同。記錄每組動物在 5min 測試期中不同時(shí)間段對兩不同物體的探索時(shí)間。