為了更清楚地了解補(bǔ)體系統(tǒng)調(diào)節(jié)中涉及的細(xì)胞反應(yīng)和分子信號。2022年6月17日，華僑大學(xué)易立濤課題組聯(lián)合江西中醫(yī)藥大學(xué)在Cell & Bioscience上合作發(fā)表了題為“IL-1R/C3aR signaling regulates synaptic pruning in the prefrontal cortex of depression”的研究性論文，闡述了補(bǔ)體C3/C3aR如何介導(dǎo)抑郁癥中的神經(jīng)元和突觸損傷。

首先，該課題組發(fā)現(xiàn)阻斷C3信號通路可以補(bǔ)救CUMS小鼠的快感缺失；蛋白組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，C3信號通路阻斷劑SB290157可以逆轉(zhuǎn)CUMS小鼠產(chǎn)生的多種蛋白的異常上調(diào)；GO分析發(fā)現(xiàn)這些異常蛋白涉及到補(bǔ)體介導(dǎo)的突觸修飾，細(xì)胞表面受體信號通路、細(xì)胞信號傳導(dǎo)等。

隨后課題組培養(yǎng)了脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的小鼠急性抑郁模型，發(fā)現(xiàn)在LPS注射后0-6小時——移動能力受損而糖水偏愛度未改變的階段，大腦前額皮層補(bǔ)體C3及其受體C3aR的表達(dá)顯著上升。這些數(shù)據(jù)表明，C3/C3aR信號在抑郁癥的發(fā)病初期即被激活。同樣地，課題組發(fā)現(xiàn)慢性應(yīng)激在抑郁癥早期也會誘導(dǎo)C3/C3aR。

圖1|LPS在6小時和24小時后引起前額葉皮質(zhì)中C3及其受體C3aR的升高

那么抑制C3通路能否緩解小鼠的抑郁樣行為呢？

課題組為此在CUMS小鼠中給予SB290157阻斷C3通路，發(fā)現(xiàn)阻斷C3aR信號通路可以顯著增加小鼠的糖水偏好，縮短小鼠在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中的不動時間，即阻斷C3aR通路可以有效地緩解抑郁癥狀。

圖2|阻斷C3aR通路后小鼠的行為學(xué)和WB實(shí)驗(yàn)結(jié)果

最近已經(jīng)證實(shí)轉(zhuǎn)錄因子STAT3被募集到細(xì)胞膜并在C3aR作用下被磷酸化。磷酸化的STAT3易位至細(xì)胞核，從而激活其靶基因。WB結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在CUMS小鼠中，前額葉皮質(zhì)中pSTAT3/STAT3比率增加，而SB290157可逆轉(zhuǎn)前額葉皮質(zhì)中pSTAT3/STAT3比率的增加。另有研究發(fā)現(xiàn)， DHHC7棕櫚?；?/span>STAT3，并通過其上游激活因子促進(jìn)其膜募集和隨后的磷酸化。接著，APT2去棕櫚?；?/span>pSTAT3并促進(jìn)其核易位。課題組的WB分析結(jié)果顯示：DHHC7和APT2水平在慢性應(yīng)激反應(yīng)中增加。而SB290157降低了DHHC7和APT2水平；在pSTAT3/STAT3水平的變化中觀察到相同的趨勢。此外，激光共聚焦檢測到APT2-pSTAT3和DHHC7-STAT3在小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)的高度共定位，表明棕櫚?；h(huán)在抑郁癥中誘導(dǎo)了小膠質(zhì)細(xì)胞STAT3的信號傳導(dǎo)。相反，阻斷C3aR信號通路后，APT2/DHHC7棕櫚酰循環(huán)介導(dǎo)的STAT3磷酸化也受到了抑制，炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)也顯著下降。

鑒于小膠質(zhì)細(xì)胞在抑郁發(fā)生中的重要作用，課題組對CUMS鼠PFC中的小膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行染色，發(fā)現(xiàn)SB290157抑制C3/C3aR信號通路后會降低突觸中C3水平并恢復(fù)抑郁癥中的突觸修飾效果。這些結(jié)果說明在抑郁癥發(fā)病過程中，C3通過誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞的活化，加重小膠質(zhì)細(xì)胞的突觸修飾作用，從而損傷神經(jīng)元的功能。

最后，為了探究阻斷細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)通路是否也可以減弱抑郁小鼠的C3釋放和行為缺陷，課題組使用IL-1R拮抗劑抑制了CUMS誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞IL-1R/NF-κB/C3信號通路，結(jié)果顯示：CUMS鼠的糖水偏愛得分增加，FST中不動時間減少。即阻斷IL-1R通路可以產(chǎn)生抗抑郁作用。

總的來說，本文發(fā)現(xiàn)了抑郁癥中星形膠質(zhì)細(xì)胞/小膠質(zhì)細(xì)胞之間的IL-1R/C3aR通路調(diào)控神經(jīng)元的突觸修飾，而抑制IL-1R/C3aR可能會緩解神經(jīng)元損傷和抑郁樣行為，為抗抑郁藥新靶點(diǎn)的探究提供了新的思路。